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LP-UV-NIR260 紫外可见近红外分光光度计吸收的本质:分光光度法是利用物质对不同波长光的选择吸收特性而建立起
来的分析方法。通常利用棱镜或光栅分光来取得单色光,使单色光连续地依次通
过溶液,并测得该溶液对每一波长的吸收,得到吸收光谱曲线。
吸收光谱来源于物质对光的选择吸收,这是物质的宏观现象,而吸收的本质
是分子内部运动和光相互作用的结果。当物质的分子吸收一定能量或波长的光谱
后,透过的光谱中有些波长被吸收就形成了吸收光谱。吸收的能量愈小,则相应
的光的波长,吸收峰出现在较长波段。当吸收在红外区时形成红外吸收光谱,如
果吸收能量愈大,则相应的波长愈短,吸收峰出现在较短波段,当吸收在紫外区
产生紫外吸收光谱。
2)LP-UV-NIR260 紫外可见近红外分光光度计吸收定律—朗伯比耳定律:当一束平行单色光通过均匀的溶液时,其吸光度
与溶液的浓度和厚度的乘积成正比。
其数字表达式:A=KCL=LogI0/I=-LogT
吸收定律数字表达式成立的前提:①,入射光为单色光,②,吸收过程中各
物质无相互作用,各物质吸光度具有加和性,③,光与物质的作用*于吸收过
程,没有荧光散射和光化学现象,④,吸收物是一种均匀分布的连续体系,
3)影响分光光度法的原因:
a,辐射与物质的非吸收作用引起的误差,
b,荧光与光化学反应的影响,一般说来,荧光对分光光度测量产生的误差
可以忽略,多数情况下显色体系的荧光效率很小,而且荧光发射是各向同性,只
有一小部分沿着透射光方向进入检测器,使测量吸光度偏低,产生负偏离。荧光
对吸收测量的影响*程度上决定于仪器的吸收池和检测器光学设计,
c,反射和散射,吸收定律只适用于均匀介质的吸收体系,浑浊溶液因散射
使实测吸光度增加,导致偏离比耳定律,
d,仪器的非理想性引起的误差,
e,复色光对比耳定律的偏离,大多数光度计只能获得接近于单色光的狭窄
的光通带,实际上仍是有复色光性质,可导致偏离比耳定律。偏离的大小取决于
二单色光的摩尔吸光系数差△ε,|△ε|很小时,可近似认为是单色光,在低浓
度时,工作曲线仍为直线,但浓度较大时,随浓度增大,A-C曲线弯曲愈严重,
故比耳定律只适用于稀溶液,
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