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谷物、食用油中的黄qu霉毒素快速检测
谷物、食用油中的黄qu霉毒素快速检测
黄qu霉毒素 B1(Aflatoxin B1 简写为 AFB1)是目前已知的化学物质中致癌性zui强的一种。黄qu霉毒素 B1 对人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。国家质检总局规定黄qu霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。本品的黄qu霉素B1检测灵敏度为 5ng/ml(5ppb)。
【黄qu霉素B1检测检测原理】
本品采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术,通过单克隆抗体竞争结合 AFB1-BSA 偶联物和样品中可能含有的 AFB1 的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的 AFB1-BSA 偶联物和被胶体金标记的抗 AFB1 单克隆抗体。
【样 品 制 备】
1. 谷物:任取 5g 以上有代表性样品并粉碎过 20 目筛,准确称取 2.0g 均匀粉碎试样于配套离心管中,再准确加入 4ml 纯净水和 4.0ml 乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡 5min,4000rpm 离心 1min 得上清液,将上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸发皿或小玻璃杯中,用电吹风吹干上清液,再根据样品的种类按以下规定的稀释液量,用铝箔袋内配套吸管反复冲洗,*溶解杯底所有的固体,此溶解液为样品提取液即检测液。考虑不同样品对黄qu霉毒素 B1 的zui高含量要求,请参考下表进行用稀释液溶解杯底固体:
2. 饲料(以黄qu霉素B1检测残留* 50ppb 计算):任取 5g 以上有代表性样品并粉碎过 20 目筛,准确称取 2.0g 均匀粉碎试样于配套离心管中,再准确加入 4ml 纯净水和 4.0ml 乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡 5min,4000rpm 离心 1min 得上清液,将上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸发皿或小玻璃杯中,用电吹风吹干上清液,再以 2ml 的稀释液量用铝箔袋内配套吸管反复冲洗,*溶解杯底所有的固体,此溶解液为样品提取液即检测液。如果黄qu霉素B1检测残留*是 30ppb,则用 1.2ml 的稀释液溶解;如果残留*是 40ppb,则用 1.6ml 的稀释液溶解。
3. 食用油:称 2.0g 油样于小烧杯中,用 8ml 正乙烷分次将试样转移至分液漏斗中,准确加入 4ml 纯净水充分振荡 3min,吸去上层正乙烷层,再加入4ml 的乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡 5min,静置或 3000rpm 离心得上清液,将上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中,用电吹风吹干,再用稀释液溶解后为样品提取液。
4. 酱油、醋、发酵酒:称取 25.0g 样品于小烧杯中,用 5ml 蒸馏水将试样转移到分液漏斗中,加入 20ml 三lv甲烷,加塞轻轻振摇 3min,静置分层。放出下层三lv甲烷层,经盛有约 5g 预先用三lv甲烷湿润的无水 Na2SO4 过滤器于蒸发皿中,后用少量三lv甲烷洗涤过滤器,洗液并于蒸发皿中,用电吹风吹干。吹干冷却后,准确加入稀释液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
【黄qu霉素B1检测步骤】
1. 在进行黄qu霉素B1检测前先完整阅读使用说明书,使用前将试纸卡和待检样本溶解恢复至室温;
2. 从原包装袋中取出试纸卡,打开后平放在桌面上,请在 1 小时内尽快使用;
3. 用吸管吸取待检样品溶液,滴加 3 滴于加样孔中,加样后开始计时;
4. 结果应在 10min 内读取,超过 12min 的时间判读无效。
【黄qu霉素B1检测结果判定】
1. 阳性:位置 C 显示出红色线条,而位置 T 不显色时,或者位置 C 显示出红色线条,位置 T 显示颜色非常模糊时,判为阳性。阳性结果表明:AFB1 含量超过样品允许量。
2. 阴性:位置 C 显示出红色线条,位置 T 同时显示出红色线条,且 T 线颜色接近 C 线或者深于 C 线时,判为阴性。阴性结果表明:AFB1 含量低于样品允许量。
3. 无效:位置 C 不显示出红色线条,而位置 T 显示出红色线条,该试纸卡视为无效。建议使用新的试纸卡按本说明书要求重新测试。
【黄qu霉素B1检测注意事项】
1. 请按照操作步骤进行黄qu霉素B1检测,操作时请勿触摸试纸显示区。
2. 如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处进行更换。
3. 黄qu霉素B1检测试纸卡为一次性产品,请勿重复使用。
4. 如遇稀释液不足,请用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。
5. 本品为筛选试剂,任何阳性结果请用其他方法做进一步确认。
6. 有条件的实验室可以用 AFB1 标准品测试后作为判断参考。
【储藏条件与有效期】
本品应保存在干燥阴凉处(4--30℃),有效期 18 个月。
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